对于冻干和冷冻制剂处方，在冷冻浓缩过程中缓冲成分的结晶倾向成为一个重要的考虑因素，在冷冻过程中缓冲成分的选择性结晶可能导致辫贬值的变化，从而影响蛋白质的稳定性。磷酸盐缓冲液是一种被广泛研究的例子，其中十二水磷酸二钠（磷酸盐缓冲液的基本成分）在冷冻过程中降低了冷冻浓缩液的辫贬值，并可能改变蛋白质的稳定性。
缓冲液的结晶行为和冻结过程中相关的辫贬值变化取决于几个因素，包括缓冲液的类型和浓度、初始溶液辫贬和其他配方成分的浓度。
下图显示了不同缓冲液在冻结时的辫贬值变化，按初始辫贬值的递增顺序(从左到右)绘制。左图为缓冲液辫贬偏移＞1单位，右图为缓冲液辫贬偏移≤1单位。填充的圆圈表示每种缓冲溶液在室温25℃时的初始辫贬值。箭头指向冻结过程中辫贬值变化的方向，箭头的顶端表示将溶液冻结至-25℃后的最终辫贬值。
从图中可以观察到不同因素对缓冲液冻结过程中辫贬值变化的影响。
（1）初始辫贬值：柠檬酸盐缓冲液对初始辫贬为5.0或6.0的溶液效果良好，但当初始辫贬为4.0时，辫贬值会发生词+2个单位的变化（浅橘红色，左图第一个柱子及右图两个同色柱子）。同样，组氨酸缓冲液在辫贬为5.5时显示+2个单位的辫贬位移，而在辫贬为6.0和7.0时则没有（深绿色，左图第四个柱子及右图两个同色柱子）。
（2）缓冲液浓度：缓冲液的浓度对pH值变化的幅度和性质都有显著的影响。例如，初始pH值为7.2的磷酸盐缓冲液，浓度为100 mM时，最终冻结后pH值为2.8，浓度为10 mM时，最终冻结后pH值为4.1（左图最右侧两个柱子）。
（3）与其他溶质的相互作用：制剂处方中的其他溶质和缓冲液组分的相互作用可能会影响彼此的结晶倾向。了解共溶质对缓冲液结晶的影响是很重要的，因为这将影响冷冻浓缩液的辫贬，从而影响蛋白质的稳定性。
例如，当含有磷酸盐缓冲液(10或100 mM)和甘氨酸(0.8% w/v)的溶液被冷冻时，这两种组分都更易结晶。虽然这并不影响甘氨酸作为冻干赋形剂的功能，但缓冲盐的明显结晶导致冻结时pH值发生变化。
有趣的是，0.8% w/v浓度甘氨酸的存在增加了10mM和100mM磷酸盐缓冲液在冷冻时的pH值变化幅度。而在低浓度(0.4% w/v)下，甘氨酸反而会抑制磷酸盐缓冲液在冷冻时的pH值变化。然而，在如此低的浓度下，甘氨酸可能无法发挥冻干赋形剂的作用。因此，需要明智地选择配方成分及其浓度，以确保各个组分的功能，从而获得稳定的冻干制剂处方。
同样，磷酸盐缓冲液也能抑制甘露醇结晶。下图展示了缓冲液浓度对甘露醇和甘氨酸在最终冷冻产物中结晶情况的影响，溶液中甘露醇和甘氨酸含量为5% w/w。当甘露醇和甘氨酸混合使用时，磷酸盐缓冲盐在冷冻溶液中显著抑制这两种溶质的结晶，磷酸盐缓冲液浓度的增加（50mM~200mM）降低了甘露醇和甘氨酸的结晶度。
甘露醇和甘氨酸的结晶度降低，可以转化为更高的蛋白酶活性保留。下图为冷冻干燥后辅料结晶对乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响。上半部分为蛋白酶活性与缓冲液浓度的关系（配方中甘露醇和甘氨酸各占5% w/w），可见随着缓冲液浓度升高，冻干后保留的蛋白酶活性升高。下半部分为最终产物中的结晶甘露醇和甘氨酸馏分。随着缓冲液浓度升高，冻干产物中甘露醇和甘氨酸的结晶度降低。
一般来说，只有无定形的溶质才能抑制缓冲液的结晶。然而，当共溶质结晶时，也观察到缓冲结晶。
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